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熒光標(biāo)記在生物學(xué)眾多的研究領(lǐng)域中有著十分廣泛的應(yīng)用，已經(jīng)成為研究體內(nèi)或細(xì)胞成像及生物細(xì)胞功能的重要工具。熒光標(biāo)記方式一般有兩種，一種是細(xì)胞表達(dá)的熒光蛋白，另外一種是化學(xué)合成的熒光分子，此外，螢光素酶也是細(xì)胞標(biāo)記的常用方法。每一種熒光分子都有其獨te的激發(fā)波長和發(fā)射波長。螢光素酶不同于熒光分子，其發(fā)光機(jī)制是利用酶與底物的反應(yīng)，催化發(fā)出的化學(xué)發(fā)光，其發(fā)光并不需要激發(fā)光的參與，常用于體內(nèi)成像及螢光素酶報告基因的定量實驗。熒光蛋白如何選擇呢？讓我們一起來看看吧！一、激發(fā)波長/發(fā)射波長...

實驗室工作中，經(jīng)常會需要用到純化的DNA，這時我們通常需要使用一個商業(yè)的DNA提取試劑盒對目的DNA進(jìn)行分離純化。市面上有很多類型的提取試劑盒，當(dāng)使用不太熟悉的樣本類型時，選擇合適的盒子是尤為關(guān)鍵的，應(yīng)該如何選擇呢？讓我們一起來看看吧！一、試劑盒組分目前大多數(shù)DNA提取試劑盒遵循相同的基本步驟:裂解，柱純化，洗滌雜質(zhì)，柱洗脫。然而，不同的盒子在完成每個步驟的方式上有很大的不同。二、使用的樣本類型不同的DNA來源有不同的試劑盒，從實驗室培養(yǎng)的細(xì)胞，到臨床樣本，土壤樣本，甚至指紋...

目前比較常用的提取DNA的方法有：苯酚氯仿抽提法、離心柱法和磁珠法，提取DNA的這些方法有哪些優(yōu)缺點呢？你都知道嗎？讓小編帶你來看看吧！一、苯酚氯仿抽提法苯酚氯仿提取DNA是利用酚是蛋白質(zhì)的變性劑，反復(fù)抽提，使蛋白質(zhì)變性，SDS(十二烷基磺酸鈉)將細(xì)胞膜裂解，在蛋白酶K、EDTA的存在下消化蛋白質(zhì)或多肽或小肽分子，變性降解核蛋白，使DNA從核蛋白中游離出來。而DNA易溶于水，卻不溶于有機(jī)溶劑。蛋白質(zhì)分子表面帶有親水基團(tuán)，也容易進(jìn)行水合作用，并在表面形成一層水化層，使蛋白質(zhì)分子...

抗體保存好，實驗失敗少。那抗體如何保存合適？讓我們一起來看看吧！一、保存溫度和條件很多抗體的最佳保存條件是分裝成小包裝凍存于-20°C或-80°C。分裝能使凍融引起的損失減到最小，同時可避免多次在一個管內(nèi)取樣而由槍頭引入的污染。分裝凍存的抗體，融解一次后剩余抗體應(yīng)保存于4°C。收到抗體后，應(yīng)10,000xg離心20秒，使管口螺紋內(nèi)的抗體溶液全部離心至管底，用低蛋白吸附性的微量離心管分裝。分裝量的多少取決于每次試驗的使用量。分裝量不能少于10μl；分裝量越少，由于蒸發(fā)和吸附于管...

轉(zhuǎn)染方法很多，常見的有：DEAE－葡聚糖法、磷酸鈣法、陽離子脂質(zhì)體法、陽離子聚合物、逆轉(zhuǎn)錄病毒(RNA）、病毒介導(dǎo)法、Biolistic顆粒傳遞法（基因槍粒子轟擊法）、顯微注射法、電穿孔法等。常用的轉(zhuǎn)染方法有哪些不同？讓我們一起來看看吧！一、DEAE－葡聚糖法原理：帶正電的DEAE-葡聚糖與核酸帶負(fù)電的磷酸骨架相互作用形成的復(fù)合物被細(xì)胞內(nèi)吞。主要應(yīng)用：瞬時轉(zhuǎn)染特點：相對簡便、重復(fù)比磷酸鈣好,但對細(xì)胞有一定的毒副作用,轉(zhuǎn)染時需除血清且一般只用于BSC-1,CV-1,COS細(xì)胞系...