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022-66387942簡要描述:小鼠B細胞分離試劑盒,天津益元利康生物科技有限公司為您提供英諾思產(chǎn)品,如T細胞激活磁珠、鏈霉親和素磁珠、細胞分選試劑盒等,歡迎咨詢選購。
一、產(chǎn)品簡介
小鼠B細胞分離試劑盒 #SN4001
本試劑盒采用陰選的方式,通過無柱磁極分離小鼠脾臟中的B細胞。分離過程中抗體和磁珠不會接觸B細胞,能夠最大限度保持B細胞最原始的狀態(tài)。
• 操作簡便
• 無需烈紅
• 純度最高可達99%
• 18-20分鐘完成分離
試劑盒通過生WU素偶聯(lián)的抗體標記非B細胞,再將細胞和鏈霉親和素納米磁珠孵育偶聯(lián),然后通過磁極進行無柱分離。目標細胞只需倒入一個新的管中即可分離,分離后的細胞可立即用于后續(xù)應用,如流式細胞術、細胞培養(yǎng)和功能實驗等。
二、產(chǎn)品詳情
1. 目錄表
EasylsoTM mouse CD19 B cell isolation kits(陰選,大包裝) | SN4001L | up to 1X10^9細胞 |
EasylsoTM mouse CD19 B cell isolation kits(陰選,中包裝) | SN4001M | up to 5X10^8細胞 |
EasylsoTM mouse CD19 B cell isolation kits(陰選,小包裝) | SN4001S | up to 1X10^8細胞 |
2. 試劑盒組分
產(chǎn)品名稱 | 存儲條件 | 緩沖液成分 | 功能 |
EasyIso ™ Mouse CD16/CD32 Blocker | 4°C保存,避免冷凍 | PBS, 0.1% BSA | 封閉FcR受體,降低抗體非特異性結合 |
EasyIso ™ Mouse B Cell Isolation Cocktail | 4°C保存,避免冷凍 | PBS, 0.1% BSA | 識別非 B細胞抗體混合液,標記非目的細胞 |
EasyIso ™ Streptavidin Nanobeads | 4°C保存,避免冷凍 | PBS, 0.1% BSA | 磁珠結合非 B細胞,通過磁極去除 |
BSA - bovine serum albumin; PBS - phosphate-buffered saline
運輸條件: 4°C運輸
三、設備和試劑要求
緩沖液:FACS Buffer (1 x PBS+0.02% EDTA+2% FBS)
耗材:70 μm無菌尼龍濾網(wǎng);無菌離心管
儀器:離心機,磁力架
溫馨提示
小鼠脾臟研磨后采用70 μm無菌尼龍濾網(wǎng)過濾即可用于分離,無需采用紅細胞裂解液
采用FACS Buffer而不是PBS進行操作,能夠提高細胞得率
確保FACS Buffer滲透壓穩(wěn)定,免疫細胞較為敏感
確保每一步無菌操作,謹防污染
四、操作步驟
步驟 | 說明 | 劑量和時間 |
1 | 準備脾臟單細胞懸液至指定濃度 | 1 x 10^8 cells/mL |
2 | 加入EasyIso ™ Mouse CD16/CD32 Blocker | 100 μL/mL |
3 | 加入EasyIso™ Mouse B Cell Isolation Cocktail至樣品中 | 100 μL/mL |
4 | 抗體和細胞孵育 | 常溫孵育10 min |
5 | 震蕩混勻 Streptavidin Nanobeads | 混勻30 s |
6 | 加Streptavidin Nanobeads至樣品中 | 100 μL/mL |
7 | 輕柔混勻磁珠和細胞,孵育 | 常溫孵育5 min |
8 | 加入FACS Buffer到樣品中,輕輕混勻 | 總體積加入至2.5 mL (5 mL流式管) 總體積加入至 7.5 mL (15 mL離心管) |
9 | 樣品置于磁力架上,使磁珠吸附 | 單孔磁力架吸附(3 min) 聯(lián)排磁力架吸附(5 min) |
10 | 傾斜磁力架,將樣品倒入新的收集管中,收集樣品 | 細胞分離成功 |
五、數(shù)據(jù)
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如圖:小鼠脾臟 B 細胞的分離。(A)分離C57BL/6背景小鼠的脾臟,磨碎后采用70 μm無菌尼龍濾網(wǎng)過濾后,進行CD45和CD19染色,CD45+CD19+比例約23%。(B)采用(#SN4001)分離B細胞,分選后的CD45+CD19+細胞純度高達95.7%。
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天津益元利康生物科技有限公司,成立于2018年,坐落于天津經(jīng)濟技術開發(fā)區(qū)。公司產(chǎn)品線涉及細胞與基因治療、免疫學、分子生物學、 細胞生物學等多個方向,專注于生命科學試劑、耗材、細胞、儀器等產(chǎn)品銷售,經(jīng)營的品牌主要有:ThermoFisher、Sigma、Qiagen、EZBioscience、ZYMO Research、MedKoo、Abcam、Elabscience、GeneTex、Gentaur、immunostar、Invitrogen、invivogen、Kerafast、等等。我們提供質(zhì)優(yōu)價美的產(chǎn)品、及時到位的服務,努力成長為生命科學和生物技術企業(yè)的優(yōu)質(zhì)供應商。
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