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022-66387942本試劑盒采用陰選的方式,通過(guò)無(wú)柱磁極分離人PBMC中的NK細(xì)胞。分離過(guò)程中抗體和磁珠不會(huì)接觸NK細(xì)胞,能夠最大限度保持NK細(xì)胞最原始的狀態(tài)。
試劑盒通過(guò)生物素偶聯(lián)的抗體標(biāo)記非NK細(xì)胞,再將細(xì)胞和鏈霉親和素納米磁珠孵育偶聯(lián),然后通過(guò)磁極進(jìn)行無(wú)柱分離。目標(biāo)細(xì)胞只需倒入一個(gè)新的管中即可分離,分離后的細(xì)胞可立即用于后續(xù)應(yīng)用,如流式細(xì)胞術(shù)、細(xì)胞培養(yǎng)和功能實(shí)驗(yàn)等。
優(yōu)勢(shì):
–操作簡(jiǎn)便
–純度可達(dá)85-93%
–35分鐘左右完成分離
二、性能實(shí)測(cè)數(shù)據(jù)(對(duì)標(biāo)美天旎)
> 數(shù)據(jù)來(lái)源:中檢院細(xì)胞制品測(cè)評(píng)報(bào)告(2024-BETC-SN01)
三、操作極簡(jiǎn)
1.準(zhǔn)備PBMC單細(xì)胞懸液至指定濃度,1 x 10^8 cells/mL
2.加入EasyIso™ Human NK Cell Isolation Cocktail至樣品中,100 μL/mL
3.抗體和細(xì)胞孵育,4℃孵育15 min,
4.加入10倍體積的FACS buffer,400 g離心5分鐘后,再采用初始體積的FACS重懸。
5.震蕩混勻 Streptavidin Nanobeads,混勻30 s
6.加Streptavidin Nanobeads至樣品中,100 μL/mL
7.輕柔混勻磁珠和細(xì)胞,孵育,在4℃孵育15 min
8.加入FACS Buffer到樣品中,輕輕混勻。
總體積加入至2.5 mL (5 mL流式管)
總體積加入至 7.5 mL (15 mL離心管)
9.樣品置于磁力架上,使磁珠吸附。
單孔磁力架吸附(3 min)
聯(lián)排磁力架吸附(5 min)
10.傾斜磁力架,將樣品倒入新的收集管中,收集樣品。
細(xì)胞分離成功
> 用戶(hù)反饋:“從樣本到分選完成,比煮泡面還快!”
四、四大應(yīng)用場(chǎng)景驗(yàn)證
研究領(lǐng)域 | 實(shí)驗(yàn)方案 | 效果 |
腫瘤免疫治療 | NK細(xì)胞擴(kuò)增后殺傷肝癌細(xì)胞 | 殺傷效率提升40%* |
病毒感染研究 | HIV感染模型NK細(xì)胞功能監(jiān)測(cè) | IFN-γ分泌量增加3倍 |
細(xì)胞療法開(kāi)發(fā) | CAR-NK制備前分選 | 轉(zhuǎn)導(dǎo)效率達(dá)78% |
免疫衰老 | 老年人vs年輕人NK細(xì)胞活性對(duì)比 | 細(xì)胞毒性下降50% |
> 注:對(duì)比陽(yáng)性分選法,使用同批PBMC樣本
五、用戶(hù)痛點(diǎn)解決方案
常見(jiàn)問(wèn)題 | 英諾思對(duì)策 |
血小板污染 | 試劑盒含 CD61阻斷劑(防非特異結(jié)合) |
單核細(xì)胞殘留 | 優(yōu)化抗體配方:抗CD14高親和力 |
低溫運(yùn)輸活性下降 | 配送含 細(xì)胞保活劑(4℃維持7天活性) |
六、采購(gòu)支持政策
- 技術(shù)支援:流式方案設(shè)計(jì) + 分選protocol優(yōu)化
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