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胎牛血清有沉淀正常嗎

 更新時(shí)間:2025-04-08    點(diǎn)擊量:291

胎牛血清(Fetal Bovine Serum, FBS)在儲(chǔ)存或使用過(guò)程中出現(xiàn)少量沉淀通常是正?,F(xiàn)象,但需根據(jù)沉淀的性質(zhì)和實(shí)驗(yàn)需求判斷是否需要處理。以下是具體分析

一、沉淀的常見(jiàn)原因

1. 纖維蛋白原聚合:
胎牛血清中含有纖維蛋白原(Fibrinogen),在解凍或長(zhǎng)期靜置后可能形成絮狀或顆粒狀沉淀(肉眼可見(jiàn)白色絮狀物)。這是最常見(jiàn)的正?,F(xiàn)象。

2. 磷酸鈣結(jié)晶:
血清中的鈣、磷離子在低溫或反復(fù)凍融時(shí)可能形成細(xì)微結(jié)晶(顯微鏡下可見(jiàn))。

3. 脂蛋白聚集:
血清中的脂類成分在低溫下可能析出,形成渾濁或沉淀。

4. 蛋白質(zhì)變性:
高溫、劇烈震蕩或反復(fù)凍融可能導(dǎo)致部分蛋白質(zhì)變性沉淀(通常伴隨顏色變化或渾濁)。

二、如何判斷是否正常?

特征

正常沉淀

異常變質(zhì)

顏色

血清仍為淡黃色、透明

渾濁、發(fā)紅或發(fā)黑

沉淀形態(tài)

白色絮狀或細(xì)顆粒,可溶解于37°C水浴

塊狀、無(wú)法溶解,或伴有異味

細(xì)胞培養(yǎng)影響

通常不影響細(xì)胞生長(zhǎng)

細(xì)胞死亡、貼壁差或污染


三、如何處理沉淀?

常規(guī)操作:

將血清置于 37°C水浴 中輕輕搖晃至沉wanquan溶解(纖維蛋白原或磷酸鈣沉淀通??赡妫?。

溶解后 4°C靜置1小時(shí),取上清液使用(避免吸取底部沉淀)。

過(guò)濾除菌:
若沉淀較多或?qū)嶒?yàn)敏感(如干細(xì)胞培養(yǎng)),可用 0.22μm濾膜 過(guò)濾后使用。

四、需要更換血清的情況

以下情況可能提示血清變質(zhì),建議停止使用:

1. 沉淀無(wú)法通過(guò)37°C溶解,且血清渾濁、變色。

2. 血清有明顯異味(如酸敗味)。

3. 使用后細(xì)胞出現(xiàn)異常死亡或污染。

五、如何減少沉淀產(chǎn)生?

1. 分裝凍存:避免反復(fù)凍融,按需分裝為小份(如50ml/管),-20°C保存。

2. 緩慢解凍:4°C過(guò)夜解凍,或室溫靜置至部分融化后混勻。

3. 輕柔操作:避免劇烈搖晃或高溫環(huán)境(如長(zhǎng)時(shí)間置于37°C水?。?。

總結(jié)

少量白色絮狀沉淀(纖維蛋白原相關(guān))是正?,F(xiàn)象,不影響大多數(shù)實(shí)驗(yàn);若沉淀不可逆、血清性狀改變或影響細(xì)胞活性,則需更換新批次血清。建議選擇正規(guī)品牌(如Gibco、HyClone)并嚴(yán)格按說(shuō)明書儲(chǔ)存!

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